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中华口腔医学研究杂志(电子版)

中华口腔医学研究杂志(电子版) ›› 2009, Vol. 3 ›› Issue (04) : 382 -390. doi: 10.3877 / cma.j.issn.1674-1366.2009-04-006

基础研究

RECK 基因和基质金属蛋白酶-2 在成釉细胞瘤的表达及相关性研究
张彬1,†(), 徐志英1, 黄洪章2, 谢宏亮1   
  1. 1.510120 广州，中山大学附属第二医院口腔颌面外科
    2.510120 广州，中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院·口腔医学研究所
  • 收稿日期:2009-05-04 出版日期:2009-08-01
  • 通信作者: 张彬
  • 基金资助:
    广东省自然科学基金（06021272）

Expression of RECK and matrix metalloprotease-2 in ameloblastoma and their associativity

Bin ZHANG1,†(), Zhi-ying XU1, Hong-zhang HUANG1, Hong-liang XIE1   

  1. 1.Department of Oral and Maxillofacial Surgery， The Second Affiliated Hospital， Sun Yat-sen University， Guangzhou 510120， China
  • Received:2009-05-04 Published:2009-08-01
  • Corresponding author: Bin ZHANG
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引用本文：

张彬, 徐志英, 黄洪章, 谢宏亮. RECK 基因和基质金属蛋白酶-2 在成釉细胞瘤的表达及相关性研究[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2009, 3(04): 382-390.

Bin ZHANG, Zhi-ying XU, Hong-zhang HUANG, Hong-liang XIE. Expression of RECK and matrix metalloprotease-2 in ameloblastoma and their associativity[J/OL]. Chinese Journal of Stomatological Research(Electronic Edition), 2009, 3(04): 382-390.

目的

探讨RECK 和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达与成釉细胞瘤（AB）临床生物学行为的关系及相关性。

方法

应用免疫组化EliVisionTM plus 法检测69 例AB（原发45 例，复发24 例）、6 例成釉细胞癌和16 例牙源性角化囊性瘤（KCOT）中RECK、MMP-2 蛋白的表达，同时采用RT-PCR 方法检测22 例AB（原发12 例，复发10 例）、2 例成釉细胞癌和16例KCOT 中RECK、MMP-2 mRNA 的表达水平。 所有数据采用SPSS 13.0 统计软件包进行统计学分析。

结果

RECK 蛋白的阳性表达率在KCOT、AB 和成釉细胞癌中依次明显降低（P ＜0.05），且复发AB 显著低于原发AB（P ＜0.01）；AB 和成釉细胞癌的MMP-2 蛋白阳性表达率均显著高于KCOT（P ＜0.05）；RECK 蛋白与MMP-2 蛋白在AB 中的表达呈负相关（r=-0.431，P ＜0.001）。 RECK mRNA 在AB、KCOT 中均见表达，但在AB 的表达较KCOT 显著降低（P ＜0.001），成釉细胞癌中则无表达；MMP-2 mRNA 在KCOT、AB 和成釉细胞癌中均见表达，但在AB 的表达水平较KCOT 显著增高（P ＜0.001），在成釉细胞癌中均呈高水平表达；复发AB 的RECK mRNA 表达水平较原发AB 显著降低（P ＜0.05），但复发与原发AB 的MMP-2 mRNA 表达之间差异无统计学意义；RECK mRNA 与MMP-2 mRNA 在AB 中的表达水平无相关性（P ＞0.05）。

结论

RECK 表达降低或缺失及MMP-2 表达增高与AB 的临床生物学行为密切相关。RECK 可能通过转录后水平调控MMP-2 参与AB 的侵润、复发和恶性转化过程。

关键词: RECK, 基质金属蛋白酶-2, 成釉细胞瘤, 免疫组织化学, 实时定量逆转录-聚合酶链反应

Objective

To explore the relationship and correlation between RECK and matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） expression and the clinnical biological behavior of ameloblastoma （AB）.

Methods

EliVisionTM plus 2-step immunochemistry staining method was employed to detect protein expression of RECK and MMP-2 in the paraffin-embedded specimens of 69 cases of AB （including 45 cases of primary AB and 24 cases of recurrent AB）， 6 cases of ameloblastic carcinoma and 16 cases of keratocystic odontogenic tumor （KCOT）， and mRMA expression of RECK and MMP-2 in fresh specimens of 22 cases of AB （including 12 cases of primary AB and 10 cases of recurrent AB）， 2 cases of ameloblastic carcinoma and 16 cases of KCOT was detected using reverse transcription-polymerase chain reaction （RT-PCR）. All data were analyzed by SPSS13.0 software package.

Results

Immunoreactivity for RECK sequentially reduced in KCOT， AB and ameloblstic carcinoma （P ＜0.05）， and its expression showed downregulation in recurrent AB compared with primary AB （P ＜0.01）. Immunoreactivity for MMP-2 in AB and ameloblastic carcinoma enhanced compared with KCOT （P ＜0.05）. RECK had a negative relationship with MMP-2 in protein expression in AB （r=-0.431）. The expression of RECK mRNA in AB reduced compared with KCOT （P ＜0.001）， and there was no expression in ameloblsic carcinoma. The mRNA level of MMP-2 in AB increased compared with KCOT （P ＜0.001）， and there was a high level of expression in ameloblastic carcinoma. RECK mRNA in recurrent AB decreased compared with primary AB （P ＜0.05）， but MMP-2 mRNA showed no siginificant difference between recurrent AB and primary AB. RECK had no relationship with MMP-2 in mRNA expression in ameloblastoma.

Conclusions

Decreased or absent expression of RECK and increased expression of MMP-2 may be associated with the clinnical biological behavior of AB，and RECK may participate in the invasion， recurrence and malignant transformation of AB by regulating MMP-2 at post-transcriptional level.

Key words: RECK, MMP-2, Ameloblstoma, Immunohistochemistry, RT-PCR
表1 RECK、MMP-2、β-acting 引物序列和产物大小
基因 上游序列（5'-3'） 下游序列（5'-3'） 产物大小
RECK ACCAAATGTGCCGTGATGTA TCCAAGGCAATAAGCCAGTTC 207 000
MMP-2 GATGCCGCCTTTAACTGG TCAGCAGCCTAGCCAGTCG 279 000
β-acting GATGAGATTGGCATGGCTTT CTCAAGTTGGGGGACAAAAA 431 000
图1 RECK 蛋白的表达 A. RECK 在KCOT 中见强阳性表达（×400）； B. RECK 在滤泡型AB 中阳性表达（×400）； C. RECK 在丛状AB 中阳性表达（×200）；D. RECK 在成釉细胞癌中阴性表达（×400）
图2 MMP-2 蛋白的表达 A. MMP-2 在KCOT 中阳性表达（×400）； B. MMP-2 在滤泡型AB 中的阳性表达（×200）； C. MMP-2 在丛状型AB 中的阳性表达（×200）；D. MMP-2 在成釉细胞癌中的强阳性表达（×200）
表2 RECK 和MMP-2 蛋白在各组织及AB 临床病理分类中的表达
分类 例数 RECK蛋白 MMP-2蛋白
阴性（-） 阳性（+ ++） P 阴性（-） 阳性（+ ++） P
组织分类
KCOT组 16 2 14（ 5 9） 13 3（ 0 3）
AB组 69 30 39（22 17） 0.000 11 58（23 35） 0.000
成釉细胞癌组 6 6 0 0 6（ 1 5）
AB分类
原发AB 45 13 32（17 15） 0.001 8 37（19 18） 0.82
复发AB 24 17 7（ 5 2） 3 21（ 4 17）
一般型 62 28 34（21 13） 0.34 9 53（22 31） 0.68
单囊型 7 2 5（ 1 4） 2 5（ 1 4）
丛状型 22 11 11（ 8 3） 0.90 3 19（ 9 10） 1.00
滤泡型 29 14 15（11 4） 3 26（10 16）
图3 MMP-2、RECK 和β-acting 电泳结果 A. MMP-2 mRNA 的表达（279 000），M： DNA marker，1： KCOT，2：KCOT，3：AB，4：AB，5：成釉细胞癌； B. RECK mRNA 的表达（207 000），M：DNA marker，1：KCOT，2：KCOT，3：AB，4：AB，5：成釉细胞癌； C. β-acting mRNA 的表达（431 000），M：DNA marker，1：KCOT，2：KCOT，3：AB，4：AB，5：成釉细胞癌
表3 RECK、MMP-2 mRNA 在各组织及AB 临床病理类型中的表达（）
组织分类 例数 RECK/β-acting MMP-2/β-acting
平均IOD值 P 平均IOD值 P
KOCT 16 1.361±0.145 0.000 0.099±0.047 0.000
AB 22 0.131±0.023 1.425±0.174
AB分类
原发AB 12 0.165±0.033 0.016 1.577±0.249 0.959
复发AB 10 0.907±0.278 1.561±0.208
丛状型AB 8 0.693±0.026 0.07 1.689±0.220 0.093
滤泡型AB 10 0.163±0.035 1.594±0.256
表4 AB 中RECK、MMP-2 蛋白表达之间的关系
MMP-2 RECK r P
- + ++
- 1 2 8
+ 10 6 7 -0.431 0.000
++ 19 14 2
1
Takahashi C， Sheng Z， Horan TP， et al. Regulation of matrix metalloproteinase-9 and inhibition of tumor invasion by the membraneanchored glycoprotein RECK. Proc Natl Acad Sci U S A， 1998，95 （22）：13221-13226.
2
Takemoto N， Tada M， Hida Y， et al. Low expression of reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs （RECK） indicates a shorter survival after resection in patients with adenocarcinoma of the lung. Lung Cancer， 2007，58（3）：376-383.
3
Chang CK， Hung WC， Chang HC. The Kazal motifs of RECK protein inhibit MMP-9 secretion and activity and reduce metastasis of lung cancer cells in vitro and in vivo. J Cell Mol Med， 2008，12（6B）：2781-2789.
4
van der Jagt MF， Sweep FC， Waas ET， et al. Correlation of reversion-inducing cysteine-rich protein with kazal motifs （RECK） and extracellular matrix metalloproteinase inducer （EMMPRIN）， with MMP-2， MMP-9， and survival in colorectal cancer. Cancer Lett， 2006，237（2）：289-297.
5
Oshima T， Kunisaki C， Yoshihara K， et al. Clinicopathological significance of the gene expression of matrix matrix metalloproteinases and reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs in patients with colorectal cancer： MMP-2 gene expression is a useful predictor of liver metastasis from colorectal cancer. Oncol Rep， 2008，19（5）：1285-1291.
6
Wang A， Zhang B， Huang H， et al. Suppression of local invasion of ameloblastoma by inhibition of matrix metalloproteinase-2 in vitro.BMC Cancer， 2008，8：182.
7
张彬，陶谦，黄洪章，等. 基质金属蛋白酶-2 活性与成釉细胞瘤侵袭力的关系. 中国口腔颌面外科杂志， 2007，5（2）：130-134.
8
Fujimura M， Watanabe M， Shimizu H， et al. Expression of matrix metalloproteinases （MMPs） and tissue inhibitor of metalloproteinase（TIMP） in cerebral cavernous malformations：immunohistochemical analysis of MMP-2， -9 and TIMP-2. Acta Neurochir （Wien）， 2007，149（2）：179-183.
9
Takagi S， Kato Y， Asano K， et al. Matrix metalloproteinase inhibitor RECK expression in canine tumors. J Vet Med Sci， 2005，67（8）：761-767.
10
Loukopoulos P， Mungall BA， Straw RC， et al. Matrix metalloproteinane-2 and -9 involvement in canine tumors. Vet Pathol， 2003，40（4）：382-394.
11
张彬，黄洪章，潘朝斌，等. 成釉细胞瘤MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP mRNA 的表达和意义. 口腔颌面外科杂志， 2003，13（1）：21-24.
12
Mori T， Moriuchi R， Okazaki E， et al. Tgat oncoprotein functions as a inhibitor of RECK by association of the unique C-terminal region.Biochem Biophys Res Commun， 2007，355（4）：937-943.
13
李喆，孙涛，魏雷震，等. RECK 基因在脑胶质瘤细胞中的表达及其临床意义. 中华神经外科杂志， 2006，22（9）：550-552.
14
Takeuchi T， Hisanaga M， Nagao M， et al. The membrane-anchored matrix metalloproteinase （MMP） regulator RECK in combination with MMP-9 serves as an informative prognostic indicator for colorectal cancer. Clin Cancer Res， 2004，10（16）：5572-5579.
15
Kumamoto H， Ooya K. Immunohistochemical detection of MT1-MMP， RECK， and EMMPRIN in ameloblastic tumors. J Oral Pathol Med，2006，35（6）：345-351.
16
Simizu S， Takagi S， Tamura Y， et al. RECK-mediated suppression of tumor cell invasion is regulated by glycosylation in human tumor cell lines. Cancer Res， 2005，65（16）：7455-7461.
17
Eisenberg I， Hochner H， Sadeh M， et al. Establishment of the genomic structure and identification of thirteen single-nucleotide polymorphisms in the human RECK gene. Cytogenet Genome Res， 2002，97（1-2）：58-61.
18
Oh J， Takahashi R， Kondo S， et al. The membrane-anchored MMP inhibitor RECK is a key regulator of extracellular matrix integrity and angiogenesis. Cell， 2001，107（6）：789-800.
19
Masui T， Doi R， Koshiba T， et al. RECK expression in pancreatic cancer：its correlation with lower invasiveness and better prognosis. Clin Cancer Res， 2003，9（5）：1779-1784.
20
孙涛，姜大庆，李金鸣，等. 人乳腺癌细胞RECK 基因的表达及检测. 中国肿瘤临床， 2006，33（22）：1288-1291.
[1] 赵阳, 肖迎聪, 巨艳, 党晓智, 蔡林利, 薛文欣, 李洋, 肖瑶, 郭妤绮, 宋宏萍. 自动乳腺超声联合免疫组化早期预测乳腺癌新辅助化疗病理完全缓解的临床价值[J/OL]. 中华医学超声杂志（电子版）, 2024, 21(04): 361-369.
[2] 武壮壮, 张晓娟, 史泽洪, 史瑶, 原韶玲. 超声联合乳腺X线摄影及PR、Her-2预测高级别与中低级别乳腺导管原位癌的价值[J/OL]. 中华医学超声杂志（电子版）, 2023, 20(06): 631-635.
[3] 贺媛媛, 李佳, 杨红. 宫颈中肾腺癌1例并文献复习[J/OL]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2024, 20(01): 97-104.
[4] 韩春颖, 王婷婷, 李艳艳, 朴金霞. 子宫内膜癌患者淋巴管间隙浸润预测因素研究现状[J/OL]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2023, 19(04): 403-409.
[5] 刘星辰, 刘娟, 魏宝宝, 刘洁, 刘辉. XIAP与XAF1异常表达与卵巢癌的相关性分析[J/OL]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2023, 19(04): 419-427.
[6] 陈怡芳, 黄晓卉. 肝细胞癌中对氧磷酶2的表达及临床意义[J/OL]. 中华普通外科学文献(电子版), 2024, 18(03): 186-191.
[7] 刘政宏, 王凤力, 吉亚君, 高佳. 胃癌中ELK3蛋白的表达与临床病理特征和预后的关系研究[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(02): 155-159.
[8] 郭伟林, 李运涛, 尚培中, 李晓武, 李伟. 胰腺癌S100A4和Midkine表达研究[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 149-152.
[9] 焦昆, 陈小菊, 卢静. 腹腔内置疝修补补片动物实验的病理评价[J/OL]. 中华疝和腹壁外科杂志(电子版), 2022, 16(06): 628-633.
[10] 李峻峰, 李军, 孙勤丰, 孙建光, 孔祥兴. 九例结肠髓样癌的临床病理特征分析[J/OL]. 中华结直肠疾病电子杂志, 2023, 12(03): 248-252.
[11] 汪玥, 陆衡, 曹洁, 陆博文. GNG4蛋白在胃肠道间质瘤中的表达及预后意义[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2025, 15(01): 6-10.
[12] 谭瑞义. 小细胞骨肉瘤诊断及治疗研究现状与进展[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(08): 781-784.
[13] 岳瑞雪, 孔令欣, 郝鑫, 杨进强, 韩猛, 崔国忠, 王建军, 张志生, 孔凡庭, 张维, 何文博, 李现桥, 周新平, 徐东宏, 胡崇珠. 乳腺癌HER2蛋白表达水平预测新辅助治疗疗效的真实世界研究[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2023, 17(07): 765-770.
[14] 毛高才, 张建波, 袁一方, 毛小波, 戴慧勇, 王哲. 耳后淋巴结内涎腺透明细胞型嗜酸性腺瘤的诊断学特征[J/OL]. 中华诊断学电子杂志, 2023, 11(04): 261-265.
[15] 刘迎, 尹嫚, 杨林青, 王云飞. 子宫颈浸润性复层产黏液的癌的诊断学特征并文献复习[J/OL]. 中华诊断学电子杂志, 2023, 11(03): 173-177.
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